Elektroforeesi, mikä se on, mihin se on tarkoitettu ja miten se tehdään

Elektroforeesi on laboratoriotekniikka, jonka tarkoituksena on erottaa molekyylit niiden koon ja sähkövarauksen perusteella siten, että voidaan diagnosoida sairaudet, varmistaa proteiinien ilmentyminen tai tunnistaa mikro-organismit.

Elektroforeesi on yksinkertainen ja edullinen menetelmä, jota käytetään laboratorio-ohjelmissa ja tutkimusprojekteissa. Elektroforeesin tarkoituksen mukaan diagnoosin saavuttamiseksi voi olla tarpeen suorittaa muita testejä ja kokeita, esimerkiksi.

Mistä se on

Elektroforeesi voidaan suorittaa erilaisiin tarkoituksiin, sekä tutkimusprojekteissa että diagnooseissa, koska se on yksinkertainen ja edullinen tekniikka. Siten elektroforeesi voidaan suorittaa:

• Tunnista virukset, sienet, bakteerit ja loiset, ja tämä sovellus on yleisempi tutkimushankkeissa.
• Isyystesti;
• Tarkista proteiinien ilmentyminen;
• Tunnista mutaatiot, jotka ovat hyödyllisiä esimerkiksi leukemian diagnoosissa;
• Analysoi verenkierron hemoglobiinityyppejä, jotka ovat hyödyllisiä sirppisoluanemian diagnoosissa.
• Arvioi veressä olevien proteiinien määrä.

Elektroforeesin tarkoituksen mukaan lääkärille saattaa olla tarpeen suorittaa muita täydentäviä testejä diagnoosin loppuun saattamiseksi.

Kuinka se tehdään

Elektroforeesin suorittamiseksi tarvitaan geeli, joka voi olla polyakryyliamidista tai agaroosista, riippuen objektiivista, elektroforeesipuskurista ja alvasta, molekyylipainomerkinnästä ja fluoresoivasta väriaineesta, UV- tai LED-valolaitteen lisäksi, joka tunnetaan myös nimellä transilluminator..

Geelin valmistuksen jälkeen on asetettava tietty esine siten, että kuopat tehdään geeliin, jota kutsutaan nimellä kammi, ja anna geelin asettua. Kun geeli on valmis, levitä aineet vain kaivoihin. Tätä varten molekyylipainomarkkeri on asetettava yhteen kuoppiin, positiivinen kontrolli, joka on aine, joka tiedetään, mikä se on, negatiivinen kontrolli, joka takaa reaktion kelpoisuuden, ja analysoitavat näytteet. Kaikki näytteet on sekoitettava fluoresoivaan väriaineeseen, koska tällä tavalla on mahdollista visualisoida nauhat transilluminatorissa.

Geeli näytteiden kanssa on asetettava elektroforeesisäiliöön, joka sisältää spesifisen puskuriliuoksen, ja sitten laite kytketään päälle niin, että siinä on sähkövirta ja sen seurauksena potentiaalierot, mikä on tärkeätä erottamiselle hiukkaset niiden kuormituksen ja koon mukaan. Elektroforeettinen juoksuaika vaihtelee toimenpiteen tavoitteen mukaan ja voi kestää jopa yhden tunnin.

Määritetyn ajan kuluttua on mahdollista tarkastella elektroforeesin tulosta transilluminaattorin läpi. Kun geeli asetetaan UV- tai LED-valoon, on mahdollista visualisoida vyöhykekuvio: mitä suurempi molekyyli, sitä pienempi sen kulkeutuminen, päästä lähemmäksi kaivoa, kun taas mitä kevyempi molekyyli on, sitä suurempi on siirtymispotentiaali..

Jotta reaktio voitaisiin validoida, on välttämätöntä, että positiivisen kontrollin nauhat visualisoidaan ja että negatiivisessa kontrollissa mitään ei visualisoida, koska muuten se on osoitus siitä, että oli kontaminaatiota, ja koko prosessi on toistettava.

Elektroforeesityypit

Elektroforeesi voidaan suorittaa erilaisiin tarkoituksiin, ja tavoitteensa mukaan voidaan käyttää monentyyppisiä geelejä, joista yleisimpiä ovat polyakryyliamidi ja agaroosi..

Elektroforeesi mikro-organismien tunnistamiseksi tehdään yleisemmin tutkimuslaboratorioissa, mutta diagnoositarkoituksiin elektroforeesia voidaan käyttää tunnistamaan hematologiset sairaudet ja sairaudet, jotka kehittyvät proteiinimäärän kasvaessa, koska ne ovat pääoptimeja elektroforeesissa. :

1. Hemoglobiinin elektroforeesi

Hemoglobiinielektroforeesi on laboratoriotekniikka, joka suoritetaan veressä kiertävien erityyppisten hemoglobiinien tunnistamiseksi, mikä mahdollistaa hemoglobiinisynteesiin liittyvien sairauksien tunnistamisen. Hemoglobiinityyppi tunnistetaan elektroforeesin avulla tietyllä pH: lla, mieluiten välillä 8,0 - 9,0, tarkistamalla vyöhykekuvio, jota voidaan verrata normaaliin kuvioon, mikä mahdollistaa epänormaalien hemoglobiinien esiintymisen tunnistamisen.

Mihin se on tehty: Hemoglobiinielektroforeesi suoritetaan tutkimaan ja diagnosoimaan hemoglobiinisynteesiin liittyviä sairauksia, kuten sirppisoluanemia ja hemoglobiini C -tauti, sen lisäksi, että ne ovat hyödyllisiä talassemian erottamisessa. Opi tulkitsemaan hemoglobiinielektroforeesi.

2. Proteiinielektroforeesi

Proteiinielektroforeesi on lääkärin pyytämä koe veressä liikkuvien proteiinien määrän arvioimiseksi ja siten sairauksien tunnistamiseksi. Tämä testi tehdään verinäytteestä, joka sentrifugoidaan, jotta saadaan plasma, veren osa, joka koostuu muun muassa proteiineista.

Elektroforeesin jälkeen voidaan visualisoida vyöhykekuvio ja myöhemmin käyrä, jossa kunkin proteiinifraktion määrä ilmoitetaan, joka on diagnoosin kannalta keskeinen.

Mihin se on tehty: Proteiinielektroforeesin avulla lääkäri voi tutkia multippelin myelooman, kuivumisen, kirroosin, tulehduksen, maksasairauden, haimatulehduksen, lupuksen ja verenpainetaudin esiintymisen nauhakuvion ja tutkimusraportissa esitetyn kaavion mukaan.

Ymmärrä miten se tehdään ja miten ymmärtää proteiinielektroforeesin tulos.